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15502280048
簡要描述:活性氧檢測試劑盒 Ros檢測 100T本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。
品牌 | 其他品牌 | 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
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級別 | 化工級 |
活性氧檢測試劑盒 Ros檢測 100T
活性氧檢測試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一種利用熒光探針 DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA 本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而 DCFH 不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH 生成有熒光的DCF 。檢測DCF 的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測。Rosup 是一種混合物,濃度為50mg/mL 。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定100~500 個樣品。
產(chǎn)品簡介:
活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針H2DCFDA進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。H2DCFDA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH,而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。根據(jù)活細(xì)胞中熒光的產(chǎn)生,可以判斷細(xì)胞活性氧的含量和變化。用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察,是一種經(jīng)典的活細(xì)胞中活性氧檢測方法。
本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測。Rosup是一種活性氧陽性誘導(dǎo)藥物,濃度為50mg/mL,根據(jù)其熒光信號強(qiáng)度,可分析活性氧的實(shí)際水平。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定1000個樣品(以96孔板為標(biāo)準(zhǔn))。
產(chǎn)品組成:
組分規(guī)格
(10mM)100μl
活性氧陽性對照(Rosup, 50mg/mL)1ml
圖例:使用活性氧檢測試劑盒來顯示CHO細(xì)胞內(nèi)活性氧熒光。左圖為CHO細(xì)胞用試劑盒配備的活性氧陽性對照處理;右圖為正常CHO細(xì)胞。綠色熒光表明細(xì)胞活性氧急劇增加,并能顯示其定位。
注意事項(xiàng):
1、 探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針,否則會導(dǎo)致背景較高。
2、 陽性對照Rosup 一般使用濃度為100μM(推薦濃度100-400μM,具體依細(xì)胞類型而定)。通常刺激后0.5-4h可觀察到顯著的活性氧水平升高。對于不同的細(xì)胞,活性氧陽性對照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后30 min內(nèi)觀察不到活性氧的升高,可延長誘導(dǎo)時間或適當(dāng)提高活性氧陽性對照的濃度。如果活性氧升高得過快,可縮短誘導(dǎo)時間或適當(dāng)降低活性氧陽性對照的濃度。
3、 對于某些特別的細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)過程中如果發(fā)現(xiàn)沒有刺激的陰性對照細(xì)胞熒光也比較強(qiáng), 可以按照1:2000-1:5000稀釋DCFH-DA,使DCFH-DA的終濃度為2-5μM,濃度過高容易出現(xiàn)非特異性染色。探針裝載的時間也可以根據(jù)情況在15-60 min內(nèi)適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。
4、 活性氧陽性對照(Rosup)僅僅用于作為陽性對照的樣品,其他正常實(shí)驗(yàn)樣品無需加入。
5、 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進(jìn)行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描,以確認(rèn)探針的裝載情況是否良好。DCF的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜請參考上圖。
6、 盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),因?yàn)樘结樔菀籽趸?,?dǎo)致本底熒光值升高,所以建議工作液現(xiàn)用現(xiàn)配,以減少各種可能的誤差。
7、 如果定量的話需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。先做一個不同濃度H2O2氧化DCFA熒光值,做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,X軸為H2O2濃度,y軸是熒光值,得出一個方程,再看樣品的熒光值即Y值是多少,對應(yīng)的X值即對應(yīng)的H2O2濃度。
8、 實(shí)驗(yàn)組熒光值不高可能是因?yàn)橛械募?xì)胞在裝載探針后細(xì)胞容易漂起來,洗細(xì)胞時實(shí)驗(yàn)組會吸走一部分細(xì)胞。所以在種細(xì)胞時可以把細(xì)胞量增加一倍,這樣細(xì)胞緊密連接,貼壁比較牢,實(shí)驗(yàn)組的熒光值就高了。
9、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
-20℃避光保存,有效期一年。
活性氧檢測試劑盒 Ros檢測 100T 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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