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本生簡述,如何選擇PCR實驗的所需耗材?
一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉(zhuǎn)錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴增長度等問題,但很少有人會想到耗材的選擇,可能也會影響您的實驗結(jié)果。那么關(guān)于PCR實驗耗材我們改如何選擇呢?下面BUNSEN本生小編詳解不放來看下:
需要明確的是我們做的是哪種PCR實驗。根據(jù)檢測方法的不同,PCR實驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法,者一般是終點PCR跑膠法測定,所以在選擇耗材時需要關(guān)注的主要是耗材本身的導(dǎo)熱性和密封性;而后者是實時檢測熒光信號,除了導(dǎo)熱性和密封性外,對透光性和避光性也有所要求。換句話而言,可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來做普通PCR,反之,效果卻會差很多!
確定好了實驗類型,我們就可以選擇耗材了,如面所述,我們知道了密封性、導(dǎo)熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關(guān)注的,那為什么要關(guān)注這些呢?
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對于下一輪實驗的污染也就越少,也就意味著假陽性的產(chǎn)生率越低。
二、導(dǎo)熱性
導(dǎo)熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準(zhǔn)確度也越高。
三、透光性
這主要是對于熒光定量而言,我們知道它是一種實時定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接關(guān)系到我們檢測到的熒光信號多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測到的信號檢測不到,那就會造成我們對結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對熒光定量而言的,同上面的因素,如果我們在整個實驗過程中沒注意避光,帶有熒光的試劑過度被消耗,那*直接就會影響我們實驗的擴增效率,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果產(chǎn)生。
PCR單管
采用的一次注塑成型技術(shù),超薄設(shè)計,熱傳導(dǎo)快,視窗比平面低,不易被劃擦,管子密封性更好,近乎零蒸發(fā),減少了氣溶膠的污染,*大程度避免了假陽性的產(chǎn)生。熒光系列,蓋子高度透光,可適用于頂讀與低讀。
八聯(lián)管(適用普通PCR)
低于平面的高透視窗設(shè)計,可以*大程度避免被劃擦。進口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和穩(wěn)定的不黏壁性,確保了樣品處理和吸取時的精準(zhǔn)度。
PCR板
不同于市面上其他廠家底部注塑的方式,BUNSEN本生注塑點是在板面上的孔與孔的交叉處,這樣使得PCR板的管底與PCR儀的接觸更好,同時采用純度高達99.9%的聚丙烯,超薄設(shè)計、壁厚一致均勻的工藝使得熱傳導(dǎo)精確、控溫準(zhǔn)確、有效減少了實驗循環(huán)時間。
本生簡述,如何選擇PCR實驗的所需耗材?既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等),ELISA試劑盒,移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,吸頭,儀器及手套,培養(yǎng)基,抗體,血清,色譜耗材,針頭過濾器及實驗室常用耗材。
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