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關于胎牛血清的選擇及使用您知道嗎?
由于胎牛血清來源的特殊性,如何正確的選擇成了一個比較難的話題。那么如何來甄別和選擇血清,正確的使用血清,下面來看下BUNSEN本生技術小編的詳解?
1.看產地
受供體飼養環境、生產工藝等因素的影響,原產澳洲、新西蘭的血清是目前品質較高的血清來源。雖然北美洲的血清質量也較高,但受疫情及國家進口政策的限制,目前尚無正規渠道購買北美的血清產品。
2.看外觀
1)顏色:根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清質量并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
2)澄清度:高質量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。
3)血清沉淀:血清有沉淀,是質量問題?血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,跟加工生產方式、是否反復凍融密切相關。雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.看批間差異
采購血清要關注血清的批間差異。經驗豐富的供應商會制定嚴謹的質檢標準,確保血清篩選標準的一致性,盡可能降低血清的批間差異,盡可能消除因采血、生產、貯藏工藝不同而造成的批間差異。
后,適合自己細胞生長的才是好的。
BUNSEN本生技術小編闡述——胎牛血清正確使用:
一、胎牛血清的功能
血清的成分十分復雜,既有協助物質運輸的蛋白、營養物質,還有促進細胞生長的激素和因子等,正因為血清這種天然成分的復雜性,使得血清在細胞培養過程中發揮了多種功能:
1.提供維持細胞生長的激素,促進所培養細胞的生長;
2.彌補基礎培養基中沒有或含量很少的營養物質;
3.提供結合蛋白,促進細胞識別和利用維生素、脂類和其他激素等;
4.某些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用;
5.促進細胞貼壁,提供可促進細胞鋪展在塑料培養基質的因子;
6.起酸堿度緩沖液作用;
7.提供蛋白酶抑制劑,使細胞消化時殘留的胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
二、胎牛血清有哪些重要的技術性指標?
1.內毒素:標準為不高于10EU/mL。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。
2.總蛋白含量:胎牛血清總蛋白含量一般范圍是30-50mg/mL,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。
3.血紅蛋白:標準為不高于30mg/dl,顏色越紅,數值越高。
4.pH:7.0~8.0。
5.微生物:包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。
6.免疫球蛋白(IgG):免疫球蛋白的數值能*體現出采血時的牛齡情況,新生牛的血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清不含IgM,另外IgG的含量也較低。
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